□ 謝有發 馬曉娟 熊艷霞 楊凌宇 呂毅斌(通訊作者) 江中藥業股份有限公司

摘　要：采用高效液相色譜法對兩個不同廠家的藍莓提取物和新鮮藍莓中花青素的含量和種類進行對比，結果顯示，A藍莓提取物的花色苷種類單一，以矢車菊素-3-O-葡萄糖苷為主，花青素含量40.96%;B藍莓提取物的花色苷種類豐富，花青素含量43.15%;新鮮藍莓花青素含量4.45mg/g。雖然兩個樣品均達到了產品規格(花青素含量≥25%)，但A藍莓提取物的色譜圖與新鮮藍莓果的的色譜圖不符，該方法能明顯對比出不同廠家藍莓提取物的差異。

關鍵詞：藍莓提取物 花青素差異

藍莓因富含豐富的花青素，對保護視力、緩解眼睛疲勞等具有良好效果，被譽為“美瞳之果”?，F代藥理學研究表明，花青素具有抗氧化、抗腫瘤、防治心腦血管疾病、促進視力等作用[1]，在臨床上廣泛應用于治療高血壓性視網膜病變等疾病，是眼科藥物的主要活性成分[2]。藍莓提取物是一種略帶酸味的深紫色粉末，其由新鮮或冷凍的藍莓果經提取精制而成。目前，藍莓提取物在歐洲作為藥物使用，在美國和日本則作為保健食品使用。

藍莓果實中存在的花青素種類主要有5種——矢車菊素(Cy)、飛燕草素(Dp)、芍藥素(Pn)、牽?；ㄋ?Pt)和錦葵素(Mv)，他們以單糖苷形式(阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖)存在[3]，其中3-糖苷在自然界中最豐富，而高效液相色譜(HPLC)法測定花青素以矢車菊素-3-O-葡萄糖苷為對照品居多。

隨著人們生活水平的提高和對視力保護意識的增強，藍莓提取物日益受到消費者的關注和青睞，也引起了不少生產企業的聚焦。本研究采用高效液相色譜法，以矢車菊素-3-O-葡萄糖苷作為對照品，對兩個不同廠家的藍莓提取物與藍莓鮮果中花青素的含量和種類進行了對比研究，為選購藍莓提取物提供了有力的質量依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

新鮮藍莓：貴州麻江產地;藍莓提取物：廠家提供(分別編號A、B);矢車菊素-3-O-葡萄糖苷標準品(≥99%)：成都曼思特生物科技有限公司;甲醇：國產色譜純;甲酸、鹽酸等為國產分析純。

1.2 儀器與設備

Agilent 1260型高效液相色譜儀：Agilent公司;HH-2型數顯恒溫水浴鍋：國華電器有限公司;AB 204-N型電子天平：METTLER TOLEDO公司;320pH計：MeterMETTLER TOLEDO公司;超聲清洗器：南昌科昌達超聲波設備廠;離心機：長沙湘智離心機儀器有限公司;超純水儀：Heal Force Development Ltd。

1.3 供試品溶液的制備

1.3.1藍莓供試品溶液制備

精確稱取新鮮藍莓6.1924g，研碎，加入50mL 2%的鹽酸甲醇溶液(V/V)，常溫超聲提取1h，4000r/min離心15min后取上清液，加2%的鹽酸甲醇溶液(V/V)定容至100mL，用0.45μm濾膜過濾即得藍莓樣品。

1.3.2藍莓提取物供試品溶液制備

分別精確稱取兩種提取物樣品各10.0mg，加3%的甲酸水溶液(V/V)定容至10mL，用0.45μm濾膜過濾，即得藍莓提取物樣品。

1.3.3標準品溶液的制備

取矢車菊素-3-O-葡萄糖苷標準品，精密稱定，加2%的鹽酸甲醇溶液(V/V)制成濃度為0.049mg/mL標準品溶液，用0.45μm濾膜過濾，即得標準品樣品。

1.4 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18 5μm 250×4.6mm;檢測波長：525nm;流速：1.0mL/min;柱溫：30℃;進樣量：10μL，梯度條件見表1。

2 結果與分析

2.1 矢車菊素-3-O-葡萄糖苷標準品測定結果(見圖1)

2.2 藍莓提取物樣品A、B與藍莓的測定結果(見圖2、圖3、圖4)

由圖2、圖3、圖4可知，樣品A的花色苷種類單一，同圖1標準品的圖譜類似，矢車菊素的峰面積明顯較大，使其他小峰面積均可忽略不計;樣品B的花色苷種類相對豐富，其中含有矢車菊素的峰。天然藍莓果的花青素圖譜是由多個峰組成，矢車菊素只占其中一部分。

2.3藍莓、樣品A、樣品B的花色苷種類及含量對比(見圖5、表2)

表2的結果表明，按總峰面積計算花青素含量，樣品A的總峰面積主要來源于矢車菊素，含量40.96%雖已達到了所謂的規格(花青素≥25%)，但來源不真實。樣品B的花青素含量結果則是多個峰面積的總和，同樣達到了產品規格。藍莓果的花青素含量0.445%，即4.45mg/g，符合一般藍莓果花青素的含量范圍[4-8]。

圖5的結果表明，與天然、新鮮的藍莓果相比較，樣品A花色苷種類單一，以矢車菊素-3-O-葡萄糖為主，樣品B與鮮藍莓原料中花色苷種類較一致。因樣品A花色苷種類只有矢車菊素一個大峰，不符合天然藍莓提取物的特點，不建議購買使用。

3 結論

藍莓提取物被廣泛應用于食品、藥品、化妝品和保健產品等領域，具有巨大的市場潛力。正因其產品附加值高，利潤空間相當巨大，多家企業都在生產、銷售藍莓提取物，其安全性和真實性成為人們，以及相關企業關注的焦點之一。本研究為鑒別藍莓提取物提供了研究思路和方法，采用高效液相色譜法測定更準確、高效，但其分析方法尚需進一步優化、完善。

參考文獻：

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