• 固相微萃取與高效液相色譜聯用測定食品中的蘇丹紅

    2015-06-10 13:37:32 來源: 食品安全導刊

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    固相微萃取與高效液相色譜聯用測定食品中的蘇丹紅
    戴桂梅
     
      摘 要:采用固相微萃取與高效液相色譜聯用測定食品中的蘇丹紅。實驗結果顯示:蘇丹紅的濃度與峰面積之間呈現良好線性,相關系數>0.9990, 實際樣品加標回收測定中,加標回收率在96%-99%之間,相對標準偏差RSD范圍為0.43%-0.82%。該樣品前處理方法具有快速、高效、節省溶劑的優點,同時測定結果線性關系良好、回收率高、精密度好,可用于日常測定食品中的蘇丹紅。

      關 鍵 詞:固相微萃取;高效液相色譜;蘇丹紅

      蘇丹紅系列染料是非生物合成親脂性偶氮化合物,因蘇丹紅能引起實驗動物肝臟、膀胱細胞癌變,對人體健康有害并可能致癌,1995年歐盟國家已禁止其作為食用色素,我國在《食品添加劑使用衛生標準》中也禁止將蘇丹紅作為食品添加劑使用。蘇丹紅事件敲響了食品安全的警鐘,在檢測方面,研究發現現場檢測蘇丹紅方法,開發成本低、操作簡單、高效、快速、能重復應用等優點的檢測設備是今后研發的方向之一。

      目前測定蘇丹紅的前處理方法有固相萃取法、凝膠柱凈化法、旋蒸濃縮層析法,固相微萃取法。相比較,固相微萃取法節省溶劑、高效、易與分析儀器聯用。

      本文采用固相微萃取法進行樣品前處理建立與高效液相色譜聯用快速檢測食品中蘇丹紅,簡化樣品的前處理,降低成本,縮短儀器檢測時間。

      一、實驗部分

      1.主要儀器。Thermo U3000高效液相色譜儀;Agilent C18色譜柱(250mm,4.6mm,5μm);75μmCarboxen/PDMS固相微萃取頭;分析天平:0.1mg;磁力攪拌器

      2.試劑。蘇丹紅標準溶液;乙腈;丙酮;甲酸;正己烷

      3.色譜分析條件。色譜柱:Thermo C18

      流動相:溶劑A 0.1%甲酸的水溶液:乙腈=85:15

      溶劑B 0.1%甲酸的乙腈:丙酮=80:20

      梯度洗脫:流速:1.0mL/min;柱溫:30℃波長;蘇丹紅Ⅰ478nm;蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ、蘇丹紅Ⅳ520nm,于蘇丹紅Ⅰ出峰后切換,進樣量10μL。梯度條件見表1。

    表1   梯度條件

      4.標準曲線。準確吸取蘇丹紅標準儲備液,配制系列濃度分別為0、0.32、0.64、1.28、2.56、5.12μg/ml的混合標準溶液,根據各組分的響應峰面積與相應的濃度進行線性回歸,繪制標準曲線。

      5.樣品測定。加標樣品溶液置于一個3 mL萃取瓶中,將75μm Carboxen/PDMS 固相微萃取頭插入萃取瓶中,讓涂層全部浸入萃取溶液,置于磁力攪拌器上,在一定的攪拌速度下萃取20min。將75μm Carboxen/PDMS 固相微萃取頭從樣品瓶中取出后,用正己烷溶液解吸15 min,除去75μm Carboxen/PDMS 固相微萃取頭表面殘留萃取溶液。經濾膜過濾后待測。

      二、結果與討論

      1.線性關系與檢出限。蘇丹紅標準曲線在(0.32-5.12μg/mL)線性范圍內,以峰面積y為縱坐標,濃度(μg/mL)為橫坐標繪制標準曲線,得到線性方程,回歸方程、相關系數R2 =0.9993,濃度與峰面積之間呈現良好線性。

      以S\N=3時對應的濃度作為檢出限,蘇丹紅四種化合物的檢出限均在10μg/L以下。

      2.實際樣品及加標回收測定。采用本方法,對市面出售辣椒粉進行測定,檢測結果為未檢出。故取辣椒粉進行加標回收實驗。稱取樣品2g(精確到0.0001g),在樣品中添加蘇丹紅標準溶液即樣品加標量為2.56μg/mL。按上述前處理方法,進行三水平測定。精密度和回收率見表2。

    表2   加標樣品回收率與精密度

      由表可見三種分析物加標回收率在96%-99%之間,具有較高的回收率,相對偏差分別為0.62,0.82,0.43,0.60,精密度較好。

      三、結論

      本方法采用固相微萃取進行樣品前處理,簡化了樣品前處理的步驟,節省時間,同時該樣品前處理方法具有線性關系良好、回收率高、精密度好等優點,能快速、高效、準確地測定食品中的蘇丹紅。

      參考文獻:

      [1]黃曙海,龐維群.蘇丹紅染料毒性研究及食品中蘇丹紅檢測方法簡述[J].廣西預防醫學,2005(06).

      [2]戴桂梅.分子印跡-固相微萃取不銹鋼絲萃取頭的制備及其應用研究[D].華南師范大學,2011.

      [3]于林,孟冰冰,楊桂玲.辣椒制品中的蘇丹紅檢測方法的優化[J].中國調味品,2014(07).

      [4]謝維平,黃盈煜,傅暉蓉,等.凝膠柱凈化-高效液相色譜檢測食品中的蘇丹紅[J].色譜,2005(05).

      [5]陳娜,劉坤峰,張裕平.涂覆型不銹鋼絲固相微萃取/高效液相色譜聯用測定豆腐乳中的蘇丹紅[J].分析測試學報,2014(08).

      作者單位:廣西玉林市產品質量檢驗所

     
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