在同期的食安大講堂上，來自浙江省長興縣食品藥品檢驗檢測中心的實驗室主任楊云斌老師也向觀眾分享了他對于食品中微生物控制的認識。楊云斌主要講解的內容分為培養基、標準菌株、樣品前處理、常見問題總結4個方面。
培養基
    培養基的配制方法可概括為3種類型：不需要添加劑、需要添加劑、現配現用。需要添加劑的培養基分為直接添加和滅菌后添加，需要注意的是在添加過程中要做到無菌操作，使用通風柜，佩戴口罩，并且不能使用過期的添加劑。
    培養基在配制和使用過程中需要注意以下6點，①稱量準確：嚴格按照標簽上的稱量數稱取，注意單雙料的變化。②溶解充分：加水時避免干粉掛壁粘底，避免燒糊。③分裝合理：分裝量不宜超過容器容積的2/3。④厚度合適：傾注平皿形成厚度至少為3mm（90mm）每皿18~20mL，培養時間超過48h或培養溫度高于40℃，則需要傾注更多的培養基（20~25mL）。⑤滅菌方式：根據培養基成分的不同，選擇適宜的滅菌方式。⑥使用規范：溶化后的培養基應盡快使用，放置時間一般不應超過4h，且未用完的培養基不能重新凝固留待下次使用。
    標準菌株
    標準菌株的性能確認包括純度檢測和菌株的特征確認。純度檢測要分別檢測細菌菌落的形態和鏡檢特征；菌株的特征確認需要通過生化實驗和診斷血清進行鑒定。關于標準菌株的傳代保藏，常見的菌種保藏方式有半固體、斜面、磁珠、甘油等，要注意每次傳代后都要進行菌種的性能確認。標準菌株的保存原則要保證雙人雙鎖，避免污染。
    對于是否有必要配備所有標準菌株的問題，操作者應結合自己實驗室開展的檢測項目，并按照GB 4789.28-2013附表D.9以及附錄E中所列的標準菌株酌情進行配備。
    樣品前處理
    微生物的檢驗首先是樣品前處理—均質。固體和半固體樣品需要稱取25g樣品，盛置于225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質杯內，8000r/min~
10000r/min均質1min~2min，或放入盛有225mL稀釋液的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1min~2min，制成1:10的樣品勻液。
    對于均質袋的選用：一般樣品只需要普通均質袋；有細微顆粒的如面包等樣品建議選用側邊過濾袋；部分硬度較高的樣品建議選擇加強復合型均質袋，避免均質袋被刺破。
    樣品前處理的稀釋要用微量移液器和無菌吸管來進行，需要注意的是如果反復吹吸樣品稀釋液，容易形成有害氣溶膠，并增加污染機會。建議使用旋渦混合器，可以保證樣品稀釋液混合均勻，并減少污染。
    常見問題總結
    在演講中，楊云斌還對于微生物檢測可能出現的常見問題進行了總結，內容分為人員、機器、物料、方法、環節5個方面，希望相關工作人員對此多加留意，避免此類問題的發生。
    人員：部分企業對人員的有效監督不夠，應安排對人的監督，重點針對新上崗人員、易出問題的檢驗人員，監督員應考慮被監督人是誰，應該監督的項目和方法；培訓沒有按計劃進行，培訓結束后沒有進行培訓效果評估；壓力容器操作人員沒有壓力容器操作上崗證；微生物上崗操作考核未考專業知識及生物安全操作知識。
    機器：設備檢定、校準后未進行結果確認，期間核查后未進行評價；設備檢定、校準產生的修正因子未能正確應用；可能受污染的設備未貼污染警示標識或生物安全標識；天平使用記錄上稱量的小數點位與天平精度不一致，或與標準方法的要求稱量不一致；全自動微生物鑒定系統的核查未做或不充分。
    物料：滅菌物品與未滅菌物品放在一起；滅菌物品上無滅菌時間及有效標識，甚至無標識；培養基滅菌凝固后重復加熱溶解。
    方法：標準更新不及時，作廢標準未及時從工作場所撤出；用篩選法代替傳統方法進行病原菌檢測；方法更新前未對方法進行驗證，或是方法內容過于簡單，未進行能力確認。
    環節：在超凈工作臺的風機開啟情況下進行霉菌計數，或是進行病原微生物的操作；在生物安全柜內使用酒精燈；未對紫外線燈進行監測及評價；實驗室廢棄物與生活垃圾混放。