關鍵詞：調味品；玫瑰紅B；方法優化

 

　　現狀及危害

 

　　玫瑰紅B又稱羅丹明B、堿性玫瑰精,俗稱花粉紅,是一種鮮桃紅色的人工合成染料。經老鼠試驗發現,羅丹明B會引起皮下組織生肉瘤,被懷疑是致癌物。衛生部《食品中可能違法添加的非食用物質和易濫用的食品添加劑名單》第一批中禁止玫瑰紅B(羅丹明B)用作調味品著色。但為了獲得好的賣相,玫瑰紅B(羅丹明B)的濫用現象依舊存在于食品領域,但調味品中玫瑰紅B(羅丹明B)的檢測目前沒有國家標準,只有針對進出口食品的SN/T 2430-2010《進出口食品中羅丹明B的檢測方法》,該標準采用乙酸乙酯/正己烷=1：1提取,GPC凈化,耗時長、成本高、回收率最高只能達到70%,且容易交叉污染。

 

　　目前檢測方法探索

 

　　關于玫瑰紅B(羅丹明B)的檢測方法,目前國內外主要集中在檢測方法的選擇、提取試劑的選擇、凈化方法的選擇、本底分析判定、快速檢測試劑盒的研究等方面。檢測方法集中在薄層色譜法、液相色譜紫外檢測法、液相色譜熒光檢測法、液相色譜質譜聯用法,提取試劑有傳統的乙酸乙酯/環己烷體系,還有創新改進的乙腈、酸化乙腈、乙醇/水、乙醇一氨水等,凈化方法除凝膠外,多集中在固相萃取,如C18、MCX、PCX固相萃取等,固相萃取可以得到比較干凈的待測液,但步驟相對繁瑣。

 

　　實驗室方法優化

 

　　優化說明

 

　　針對目前玫瑰紅B檢驗的這些問題,實驗室在原標準方法的基礎上，優化了檢驗方法，改變了提取試劑和凈化方法，提取試劑采用價格便宜的甲醇溶液，凈化方法采用quechers方法配備的凈化管（150mgMgSO4、50mgPSA、50mgC18混合）凈化，大大節省了成本、提高了效率。

 

　　液質聯用采用C18柱，甲醇/0.1%甲酸水作為流動相梯度淋洗可得到干擾較少的峰。經檢驗，實驗室方法最高回收率達到99.5%，在0.5ng/mL~50ng/mL范圍內，相關系數為0.995，重現性良好。陽性樣品對比，未折回收率時，優化方法的結果比采用SN/T 2430-2010、GB/T23496-2009和地方標準的高，折完回收率二者結果相當，證明甲醇做作為提取劑可充分提取所測物質，而MgSO4/PSA/C18作為凈化劑在凈化的基礎上對物質的回收影響不大，可采用這種提取和凈化方法。

 

　　對甲醇提取時間和提取次數的優化探索實驗見表1，通過回收率的計算，最終選定10mL甲醇超聲1h，提取1次。

 

　　表1不同提取條件下玫瑰紅B的回收率

 

　　甲醇用量提取次數超聲時間回收率

 

　　5mL甲醇/定容到15mL 1 20min 62.6%

 

　　每次5mL甲醇/定容到15mL 2每次20min 82.8%

 

　　每次5mL甲醇/定容到15mL 3每次20min 95.1%

 

　　10mL甲醇1 1h 99.5%

 

　　實驗步驟

 

　　提取

 

　　稱取1.00g樣品（精確至0.01g）于50mL離心管中，準確加入10mL甲醇（3.1），于旋渦混勻器上混合提取1min，再超聲提取60min后，于4000r/min離心5min，取上清液1mL于凈化管中（3.3）凈化后，離心，過0.22μm微孔濾膜后進液相色譜-質譜儀。

 

　　測定

 

　　液相色譜-質譜/質譜條件

 

　　a）色譜柱：C18柱，2.1mm（內徑）×100mm，1.7μm，或相當者；

 

　　b）流動相：乙腈——0.1％甲酸，梯度洗脫程序見表2；

 

　　表2流動相梯度洗脫程序

 

　　0 5 95

 

　　0.30 5 95

 

　　1.00 80 20

 

　　2.90 80 20

 

　　3.00 5 95

 

　　5.50 5 95

 

　　c）流速：0.30mL/min；

 

　　d）柱溫：40℃；

 

　　e）進樣量：5μL；

 

　　f）離子源：電噴霧離子源；

 

　　g）掃描方式：正離子；

 

　　h）檢測方式：多反應監測（MRM）；

 

　　i）質譜/質譜圖見圖1

 

　　結果分析

 

　　本實驗室通過對150批次辣椒粉、50批次火鍋底料、3批次調味醬的檢測結果顯示，基質對本方法的影響不大，能保證較高的回收率，經凈化管凈化，可得到較干凈的待測液，回收率高，重現性好，測定低限均為0.005mg/kg，可用于調味品中玫瑰紅B的檢驗。

 

　　參考文獻：

 

　　[1]陳勇,花錦,潘亞利,等.超高效液相色譜-電

 

　　噴霧串聯質譜法同時測定調味品與熟肉制品中6

 

　　種工業染料[J].中國調味品,2014(4):124-127.

 

　　[2]范文銳,吳青,勞揚,等.高效液相色譜

 

　　法同時測定食品中7種非食用色素[J].分析化

 

　　學,2012,40(2):292-297.

 

　　□朱輝陶相錦王魯霞菏澤市食品藥品檢驗檢測研究院

 

　　作者簡介：朱輝，女，漢，山東省泰安市，高級工程師，碩士，研究方向：食品檢驗檢測。