• 高效液相色譜法快速測定腐乳中誘惑紅的方法研究

    2021-10-12 14:28:16 來源: 食品安全導刊

    評論0  我來說兩句
    高效液相色譜法快速測定腐乳中誘惑紅的方法研究
    鮑俊竹1,俞何鋒2,彭 祺2
    (1.品測(上海)檢測科技有限公司,上海 201108;2.紹興文理學院生命科學學院,浙江紹興 312000)
    摘 要:目的:建立快速檢測腐乳中誘惑紅色素的高效液相色譜法。方法:樣品溶解調至酸性,聚酰胺富集后進行梯度洗脫,用外標法定量檢測。結果:誘惑紅的方法線性在1.0~50.0 µg/mL濃度范圍內,線性相關系數為0.999 9,樣品的加標回收率為92.00%~103.25%,相對標準偏差為0.89%~1.53%,檢出限(S/N=3)為10.0 µg/kg。結論:本方法具有操作簡單、分析時間較短、線性范圍寬和檢出限低的特點。
    關鍵詞:高效液相色譜;誘惑紅;腐乳
    食用天然色素是從動植物組織中提取出來的,一般對人體無害。食用合成色素屬于食用人工合成色素。誘惑紅等人工合成色素的著色力強,價格低廉,對于商家來說能很好地提高食品的外觀性質,因此被廣泛使用。但人工合成色素及其代謝物均具有毒性和致癌性,因此使用誘惑紅等人工合成色素一定要控制其使用量,避免過量使用對人體造成危害[1-3]。
    1 材料與方法
    1.1 材料與儀器
    1.1.1 試劑
    誘惑紅標準物質;甲醇(色譜純);0.02 mol/L乙酸銨溶液(pH=4);聚酰胺粉(200目);20%檸檬酸;去離子水;甲酸-甲醇溶液;乙醇-氨水溶液。
    1.1.2 儀器
    美國戴安P680高效液相色譜儀;電子天平;PDA-100二極管陣列檢測器(檢測波長190~900 nm);變色龍色譜工作站;恒溫水浴鍋;燒杯。
    1.2 實驗方法
    1.2.1 標準溶液的制備
    準確稱取0.100 g誘惑紅置50 mL的燒杯中,加水溶解,并把溶液于100 mL容量瓶中定容,得含量1 mg/mL標準儲備液。從中吸取適量配成1.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、20.0 μg/mL、30.0 μg/mL、40.0 μg/mL和50.0 μg/mL的系列標準溶液。
    1.2.2 樣品前處理
    稱取10.0 g腐乳樣品,加30 mL水,于恒溫水浴鍋中溫熱溶解。用20%檸檬酸溶液調至酸性(pH=4),取0.5~1.0 g
    聚酰胺粉(200目)攪拌片刻,置于60 ℃水浴中加熱,使色素完全吸附。將溶液中的聚酰胺粉通過漏斗過濾,剩下溶液用酸性熱水洗滌去糖。經甲酸-甲醇溶液洗滌至洗液無色,70 ℃的水多次洗滌至洗液中性,乙醇-氨水液分次解吸色素,收集解吸液于水浴鍋中蒸發濃縮后定容至2 mL,轉入25 mL比色管中,去離子水定容至刻度,經0.45 μm濾膜過濾后上機待測[4-5]。
    1.2.3 定量測定
    用標準物質的保留時間定性,采用外標法定量。以質量濃度(μg/mL)為橫坐標,以色譜峰面積為縱坐標繪制標準曲線。根據試樣峰面積,從標準曲線上查出試樣中組分的實際濃度。
    1.2.4 色譜條件
    色譜柱:Hypersil ODSC18(5 μm,4.6 mm×200 mm),不銹鋼柱;流動相:甲醇、0.02 mol/L乙酸銨溶液(pH=4);梯度洗脫:甲醇10%~15%,3 min;15%~98%,9 min;
    98%,6 min;流速:1 mL/min;檢測波長:510 nm;柱溫:40 ℃;進樣量:10 μL。
    2 結果與分析
    2.1 檢測波長的選擇
    色譜條件下,在190~900 nm波長處掃描,得誘惑紅的紫外吸收波譜見圖1。圖1表明誘惑紅在可見光范圍內在506 nm波長下有最大吸收。
    圖1 誘惑紅的紫外吸收波譜
     2.2 樣品前處理條件的選擇
    (1)提取液的選擇。本實驗提取誘惑紅的方法分別試用了去離子水、氨水溶液與乙醇氨水溶液。實驗表明各提取液屬乙醇氨水溶液提取誘惑紅色素的效果最好。
    (2)提取液濃縮溫度的選擇。氨水的沸點是78 ℃,在這個溫度下氨水容易揮發,因此提取液的溫度選擇在80 ℃。
    (3)提取液濃縮體積的選擇。樣品中的目標組分經提取后,提取液濃縮體積定在2 mL左右后定容所溶解的色素較完全而且回收率較好,因此選擇2 mL。
    2.3 線性關系和檢出限
    根據選擇好的色譜條件下,誘惑紅標準物質(5~50 μg/mL)
    線性范圍內以1.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、20.0 μg/mL、30.0 μg/mL、40.0 μg/mL和50.0 μg/mL的系列標準溶液進樣分析,以誘惑紅峰面積Y(mAU•min)為縱坐標、進樣濃度X(μg/mL)為
    橫坐標作圖,計算出線性回歸方程為:Y=506.8X+0.099 7,
    r=0.999 9,表明誘惑紅濃度與峰面積具有良好的線性關系。以S/N=3計得到方法的最低檢測限為10 μg/kg。
    2.4 樣品的加標回收
    配制不同濃度誘惑紅標準溶液(2.0 µg/mL、4.0 µg/mL和6.0 µg/mL);腐乳樣品溶濃度分別為5.24 µg/mL和10.20 µg/mL。加標回收以1.2.4方法處理進樣,據此計算回收率。由表1可知,不同濃度的樣品添加不同濃度的誘惑紅標準溶液,誘惑紅的回收率為92.00%~103.25%,其相對標準偏差為0.89%~1.53%,本方法是準確可靠的。
     
    2.5 精密度
    樣品重復測定6次,測得誘惑紅峰面積的RSD為1.06%,表明本方法的精密度良好。
    2.6 抗干擾實驗
    胭脂紅與誘惑紅的理化性質相同,因此選擇胭脂紅為代表進行抗干擾實驗。對腐乳樣品處理后,利用同樣的色譜條件,分別對胭脂紅和誘惑紅進行分離檢測。結果表明對各自的檢出無影響,見圖2。
    3 結論
    本文運用高效液相色譜技術對腐乳中誘惑紅進行了快速測定。優化樣品前處理條件,有效提取樣品誘惑紅。依據誘惑紅的特性選擇了乙醇氨水溶液作為提取液,效率高且可以直接上機,快速方便。對誘惑紅標準溶液進行了全掃描光譜分析,并確定檢測最適合波長為506 nm。本文方法的檢出限10.0 mg/kg,回收率在92.00%~103.25%,RSD值均<5%。本方法測定誘惑紅,其線性、精密度和回收率等指標良好,可作為檢測食品中誘惑紅的推廣
    方法。
     
    圖2 胭脂紅、誘惑紅的色譜圖
    參考文獻
    [1]Asfaram A,Ghaedi M,Abidi H,et al.Synthesis of Fe3O4 CuS Ni2P-CNTs magnetic nanocomposite for sonochemical-assisted sorption and pre-concentration of trace Allura Red from aqueous samples prior to HPLC-UV detection:CCD-RSM design[J].Ultrasonics Sonochemistry,2018,44:240-250.
    [2]Chai W B,Wang H J,Zhang Y.Preparation of polydopamine-coated magnetic nanoparticles for dispersive solid-phase extraction of water-soluble synthetic colorants in beverage samples with HPLC analysis[J]Talanta,2016,149:13-20.
    [3]呂夢莎,林能鏢,梁玉英,等.高效液相色譜法同時測定葡萄酒中16種添加劑[J].食品科學,2016,37(8):222-225.
    [4]Yalcin S,Karakas O.HPLC Detection and Antioxidant Capacity Determination of Brown, Red and Green Algal Pigments in Seaweed Extracts [J]Journal of Chromatographic Science.2021,59(4):324-337.
    [5]Akhtar M.Humayoun,B M.Extraction and quantification of major carotenoids in processed foods and supplements by liquid chromatography[J]Food Chemistry,2008,111(1):255-261.
     
    微信關注

    相關熱詞搜索:

    [責任編輯:]

    相關閱讀

    參與評論

    食安觀察網 ? 2012-2025 健食視界版權所有

    京ICP備2023024400號 京公網安備11010702002614

    地址:北京市石景山區城通街26號院(郵編100043)

    值班電話:18500121702

    国产羞羞的视频在线观看|伊人久久大香线蕉综合7|国产小屁孩cao大人|精品18videosex性欧美|亚洲人成人伊人成综合网无码